Цитоцентрифуга для автоматической окраски микобактерий туберкулёза по Циль-Нильсену и люминесцентному методу

Лабораторное оборудование и расходные материалы / Автоматы для окрашивания, Wescor (США) Эксклюзив / Цитоцентрифуга для автоматической окраски микобактерий туберкулёза по Циль-Нильсену и люминесцентному методу

Цитоцентрифуга для автоматической окраски микобактерий туберкулёза по Циль-Нильсену и люминесцентному методу

Область применения: Диагностика туберкулеза

Производители: Wescor Inc., США

Описание

          Цитоцентрифуга ТБ(Wescor Inc., США) для автоматического окрашивания клеточных препаратов на стеклах (слайдов) по методам Циля-Нильсена, Кинью, а также аураминовым и аурамин-родаминовым методами с циклом окрашивания (все стадии от фиксации до высушивания) 4,5 мин и производительностью более 150 слайдов/час (до 400 при использовании 30-слайдовой карусели).


          Автоматическое окрашивание с помощью Цитоцентрифуги ТБ имеет выраженные преимущества перед любыми другими методами окрашивания, включающие в себя скорость (3,7-10 мин), экономичность (минимальный расход реагентов при напылении), отработанную последовательность окрашивания, отсутствие перекрестной контаминации, возможность окрашивания не только карбол-фуксиновым, но и флюоресцентными методами, чрезвычайную простоту в работе. При желании вы можете использовать метод Кинью (модификация метода Циля-Нильсена), что позволяет проводить карбол-фуксиновое окрашивание без предварительного нагрева стекол.


            К дополнительным возможностям относится использование  ротора Cytopro, который позволяет автоматически седиментировать клетки из жидких суспензий на предметные стекла для быстрого получения высококачественных образцов методом «жидкостной цитологии» из любых биологических жидкостей: Цереброспинальная жидкость ,Мокрота, Моча, Бронхиальные и альвеолярные смывы, Плевральная жидкость, Перикардиальная жидкость, Синовиальная жидкость, Перитониальная жидкость, Смывы из полости рта, Желудочные смывы, Экссудаты, транссудаты, Любые виды аспиратов.


           Монослойные препараты, полученные с использованием данного метода, сохраняют все типы клеток используемой суспензии, что не возможно при использовании ручных методик.



 Процесс окрашивания:



A. Применение основного красителя


          Организмы окрашивают основным красителем (карбол-фуксином или флюоресцентным). При окрашивании Киньюн или флюорохромом нагрев не требуется, и вытяжка также может не потребоваться, если аппарат установлен в хорошо вентилируемом месте. Метод окраски Циля-Нильсенавручную обычно требует нагрева нанесением красителя на горячую пластину. При Окрашивании в аппарате «Аэроспрей»стекла и карусельное устройство (с крышкой) нагреваются в печи при температуре 70°C в течение 15 минут. Затем крышка фиксируется защелкой на карусельном устройстве, а стекла окрашивают пока они горячие. При обоих методах образуется большое количество паров фенола. Для обеспечения необходимой персональной защиты обычно при окрашивании препаратов методом Циля-Нильсена в аппарате«Аэроспрей» требуется вытяжка. В конце этапа окрашивания основным красителем в «Аэроспрее» излишки красителя удаляют промыванием и центрифугированием.


 Б. Обесцвечивание


         Для окраски кислотоустойчивых бактерий применяют широкий спектр обесцвечивателей (7). В аппарате «Аэроспрей» при окрашивании карбол-фуксином применяют метанол с азотной кислотой, так как лишь азотная кислота, являясь сильной кислотой, может контактировать с частями прибора из нержавеющей стали. Обесцвечивателем флюоресцентного красителя является изопропанол, вода и азотная кислота. Цель обесцвечивания - удалить основной краситель с некислотоустойчивых организмов. Чем ближе в «Аэроспрее» параметр окрашивания (плотность) к 1, тем меньше обесцвечивателя применятся, и чем ближе плотность окрашивания к 6, тем больше его требуется. При основном и контрастирующем окрашивании следуют такому же принципу. Низкие значения параметров (2-4) выбирают для тонких мазков. Более высокие значения параметров (5-6) – только тогда, когда мазки слишкомтолстые, чтобы окрасить и обесцветить препараты надлежащим образом. Потеря клеток также усиливается при более высоких значения параметров из-за увеличения силы распыления из дополнительных форсунок для реагента, применяемых при окраски мазков. Процесс обесцвечивания прекращается при промывании водой и кратковременном центрифугировании.


В. Контрастирующий краситель


    В качестве контрастирующих красителей для визуализации некислотоустойчивых микроорганизмов и окрашивания фона материалов для контрастности с карбол-фуксином применяют метиленовый синий или бриллиантовый зеленый. Перманганат калия используют во флуоресцентных красителях для ослабления окрашивания фона, чтобы не перепутать загрязнение (инородные тела) с флуоресцирующими организмами. После того, как контрастирование выполнено, стекла промывают и центрифугируют, чтобы удалить излишки контрастирующего красителя.


Г. Осушение центрифугированием


        Стекла осушают центрифугированием в аппарате «Аэроспрей» в течение 45 сек (950 об/мин). При высокой скорости вращения избыток воды сбрасывается со стекол, и лицевые поверхности стекол обдуваются потоком воздуха. Стекла высыхают и теперь готовы для изучения под микроскопом.


 Дополнительная опция – ротор Cytopro:


rotor 160


        Использование ротора Cytopro в аппарате дает возможность в герметичной среде осаждать быстро клетки препарата на предметные стекла для окрашивания или других целей.


        Работа цитоцентрифуги не зависит от процесса окрашивания. Пользуйтесь ротором Cytopro® (кат. № AC-160), который поставляется компаний «Wescor» по отдельному заказу в комплекте со всем необходимым. 


            В автоклавируемый ротор Cytopro вы можете загрузить до 8-ми одноразовых / многократно используемых цитокамер для проб с гигроскопическими прокладками и 8 предметных стекол.


 Разновидности контейнеров для образцов:

                     

Контейнеры для одного образца ( на 0,5 мл)


стандарт2


Контейнеры на два образца (по 0,3 мл)


дуал2


Большие одноразовые контейнеры 6,0 мл

 

мега2

 


Размеры образца на стекле:


  • -Диаметр образца на стекле – 7 мм  (одинарные на 0,5 мл)
  • -2 образца на одном стекле, диаметром по 7 мм  (двойные по 0,3 мл)
  • -Диаметр образца на стекле – 15х21 мм (большие контейнеры 6,0 мл)


          Девять программ памяти позволят вам выбирать параметры ускорения, скорость вращения и время, а также сохранять часто используемые установки, чтобы быстро обращаться к ним или работать с цитоцентрифугой в пользовательском режиме.


       Благодаря запатентованным техническим новшествам в конструкции Cytopro®, сократилась вероятность потери клеток во время отбора проб и случайного повреждения собранных проб. Ротор герметичный, что исключает утечку аэрозоля во время цитоцентрифугирования.


 Расходные материалы:


Одного набора красителей хватает для окраски 1000 стекол при полной загрузке карусели

 

Цитоцентрифуга «Асид-фаст» может окрашивать слайды 4 способами:

1.     Карбол-фуксиновый метод по Циля-Нильсену

2.     Карбол-фуксиновый метод по Кинью (ускоренный метод – без нагрева)

3.     Флуоресцентное окрашивание  Аураминовым методом

4.     Флуоресцентное окрашивание  Аурамин-Родаминовым методом

 

Карбол-фуксиновый метод


№ п/п

Каталожный номер


Наименование Реагента

1

SS-061 A


Реагент деколоризирующий Карбол-Фуксиновый

2

SS-061 BMB


Реагент Метиленовый Синий

3

SS-061BBG

SS-161BBG


Реагент Бриллиантовый Зеленый

4

SS-061CZN


Реагент карбол-фуксин Циля-Нильсена

5

SS-061CKY

Реагент карбол-фуксин Киньуна,

 

Флюоресцентный метод


№ п/п

Каталожный номер


Наименование Реагента

1

SS-061AF


Реагент деколоризирующий Флюоресцентный

2

SS-061BP

SS-161BP


Реагент Калия Перманганата

3

SS-061CA

SS-161CA


Реагент Аурамин

4

SS-061CAR

SS-161CAR

Реагент Аурамин/Родамин (модифицированный)


Общее


№ п/п

Каталожный номер


Наименование Реагента

1

SS-161M

Реагент адгезирующий Микохолд


2

SS-029C

Раствор специальный для очистки форсунок


3

SS-117

Стекла предметные, упх72шт


4

SS -218

Предметные стекла покрытые Поли-L-Лизином для двойных Цитопро контейнеров (уп 72 шт)